Delvotest法zui早在香港傳到廣東的,其使用是基于20世紀(jì)80年代初香港要求廣東出口的生奶必須“無抗”且要求采用Delvotest法檢測。該方法也是生物測定法,其試劑是由荷蘭DSM公司生產(chǎn)并由AOAC認(rèn)證。原理是利用微生物—嗜熱芽胞菌在64℃條件下培養(yǎng)2.5~3小時(shí)后會產(chǎn)酸,酸引起指示劑BCP(溴甲酚紫)變?yōu)辄S色;若牛奶樣品中不含抗生素,培養(yǎng)后樣品呈黃色,如樣品中含有抗生素, 嗜熱芽胞菌生長受到抑制而無法產(chǎn)酸,指示劑將不變色.
Delvotest法的操作步驟:
1.以無菌操作將一片營養(yǎng)藥片夾放入小試管內(nèi);
2.用微量移液管將0.1mL牛奶樣品注入小試管內(nèi);
3.把小試管放入已預(yù)熱至64℃的水浴箱或恒溫器中培養(yǎng);
4).定時(shí)3小時(shí)取出觀察顏色變化.如果底部2/3的固體介質(zhì)是黃色,則為陰性, 如果底部2/3的固體介質(zhì)是紫色,則為陽性.)
Delvotest法具有廣譜性,可檢測到?-內(nèi)酰胺類抗生素在內(nèi)的更多抗生素,如磺胺類、四環(huán)素類、大環(huán)內(nèi)酯類、氨基糖苷類、氯霉素等,其中對青霉素和磺胺類抗生素特別靈敏. 其靈敏度為:青霉素:3ppb,鏈霉素:300ppb,慶大霉素:400ppb,卡那霉素:2500ppb。Delvotest? sp 法集操作方便,嚴(yán)格實(shí)用,容易判斷,結(jié)果可靠,費(fèi)用適中等優(yōu)點(diǎn);但也易出現(xiàn)假陽性,實(shí)驗(yàn)證明:當(dāng)牛奶樣品中添加微生物防腐劑(如乳酸鏈球菌素—Nisn)或樣品中有足夠的洗滌劑殘留時(shí),便可影響嗜熱芽胞菌生長而使實(shí)驗(yàn)為陽性。